出版日期：2020年

发表刊物：《食用菌与健康》

论文作者：张倩，孙瑞祥，王妍，孙建尧，张蕊，程显好，杨树德

桑黄多糖、黄酮及三萜类化合物等活性成分具有抗肿瘤、提高免疫力等多种功效；蛹虫草含有腺苷、虫草素等成分，在抗病毒、抗肿瘤等方面也有重要作用。然而，对于二者采用超临界\(CO_2\)萃取物的抗氧化活性及黄酮、三萜含量的研究相对较少。该研究旨在填补这一空白，通过测定相关指标，为桑黄和蛹虫草的培养与产品开发提供数据支撑，进一步挖掘其在保健和药用领域的潜力。

试验材料

采用鲁东大学食用菌教研室保存的桑黄及蛹虫草菌株进行培养。桑黄以70g 大米加 90g 水为固体培养基，蛹虫草则用 30g 大米加 30g 油麦及 96g 水培养。收获的桑黄菌丝体和蛹虫草子实体经干燥、粉碎过 60 目筛后，送至南通睿智超临界科技发展有限公司，在 45MPa、50℃，\(CO_2\)流量 30L/h 并加适量乙醇夹带剂的条件下萃取 90min，于 8MPa、55℃的分离釜中获得萃取物。

试验方法

清除羟基自由基能力测定

依据Sroka.Z 和 Cisowski.W 方法改进，在含硫酸亚铁、水杨酸乙醇的试管中加入萃取物与过氧化氢溶液，37℃水浴 1h 后，以蒸馏水调零，510nm 处测吸光度，按特定公式计算清除率，同时设空白对照与阳性对照（VC）。

清除DPPH 自由基能力测定

参照Ozen.T 等方法，将样品溶液与 DPPH 溶液混合静置 30min，无水乙醇调零后 517nm 测吸光度，依公式算清除率，设空白与阳性对照。

黄酮类化合物含量测定

称取桑黄和蛹虫草萃取物配制成特定浓度溶液，以芦丁为对照品绘制标准曲线，经系列显色反应后510nm 测吸光度，代入回归方程计算黄酮含量。

三萜类化合物含量测定

以熊果酸为标准品制曲线，对桑黄和蛹虫草萃取物进行香草醛- 高氯酸显色反应等操作，550nm 测吸光度并计算三萜含量。

实验结果与分析

萃取物清除自由基能力

清除羟基自由基

在\(H_2O_2/Fe\)体系中，蛹虫草子实体萃取物清除能力较强，2.72mg/mL 时清除率达 69.17%，相当于 1mg 萃取物与 0.28mg VC 清除效果相当；桑黄菌丝体萃取物在 1.88mg/mL 时清除率为 29.85%，约与 0.17mg VC 相当。

清除DPPH 自由基

桑黄菌丝体萃取物表现突出，0.059mg/mL 时清除率为 24.45%，相当于 1.57mg VC；蛹虫草子实体萃取物 0.680mg/mL 时清除率为 21.67%，与 0.12mg VC 相当。

萃取物中黄酮和三萜类化合物含量

黄酮类化合物

桑黄菌丝体和蛹虫草子实体超临界\(CO_2\)萃取物中含量较高，分别为 4.67%、4.08%，存在显著性差异。

三萜类化合物

含量分别为34.89%、19.25%，差异极显著，且桑黄菌丝体中含量远高于蛹虫草子实体。

结论

本研究发现超临界\(CO_2\)萃取的桑黄、蛹虫草萃取物中黄酮和三萜类物质含量高于以往报道。桑黄菌丝体萃取物清除 DPPH 自由基能力强，蛹虫草子实体萃取物清除羟基自由基能力强。桑黄菌丝体中黄酮略高且三萜含量高 0.8 倍，推测三萜与 DPPH 清除相关。但因成分复杂，需借助高分辨仪器解析成分以明确抗氧化活性差异原因。同时，建议研究桑黄培养基添加木质纤维素对其活性成分的影响，为后续开发利用提供更全面依据。

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